在细胞生物学领域，快速、准确地区分活细胞与死细胞至关重要。Arcegen推出的Calcein-AM/PI活死细胞双染试剂盒，依托先进的荧光标记技术，为细胞活死检测提供更直观、更高效的分析工具。
检测原理
Calcein-AM：一种活细胞染色试剂，发绿色荧光（Ex=490 nm, Em=515 nm）。 在传统的Calcein（钙黄绿素）基础上引入乙酰甲氧基甲酯（AM）基团，增加了疏水性，可自由进入细胞，在活细胞内部，被水解为具有强绿色荧光的Calcein，该产物无法透出细胞膜，从而在活细胞内积累并发出明显绿色荧光。细胞毒性极低，是活细胞标记的理想选择。
碘化丙啶（PI）：一种细胞核染色试剂，在嵌入双链DNA后释放红色荧光（Ex=535 nm, Em=617 nm）。不能通过活细胞膜，可通过死细胞或受损细胞的细胞膜，与细胞核DNA结合并产生红色荧光，从而特异性地标记死细胞。
两种染料均可被490nm光激发，可在荧光显微镜下同时观察活细胞（绿色）与死细胞（红色），实现细胞活死状态的快速判别。
产品特点
高特异性
Calcein-AM仅能被活细胞内的酯酶水解，生成Calcein，产生的绿色荧光信号直接反映活细胞数量；PI无法透过完整细胞膜，严格标记死细胞。两者互补性强，背景信号低，不会彼此干扰。
毒性极低
Calcein-AM为活细胞染料，毒性极低，常规工作浓度对细胞增殖、趋化性、线粒体功能均无明显抑制，也不影响后续转染或流式分选。
兼容性强
适用于多种贴壁或悬浮细胞类型，检测结果不会受到细胞种类的影响。
使用便捷
每次检测仅需在清洗过细胞后将配制好的染色液加入细胞中孵育即可，随后通过荧光显微镜或酶标仪观察结果。
应用广泛
可应用于细胞增殖与毒性分析、抗癌药物或化合物筛选、细胞凋亡与坏死研究、免疫细胞活性检测等多种实验场景。
检测效果
对A375胶质瘤细胞进行Calcein-AM/PI活死染色（Calcein-AM=2μM，PI=4.5μM），染色时间15min，结果显示活死细胞可清晰区分，merge后无重叠部分，两种染料检测效果良好且互不干扰。
A：Calcein-AM染色图；B：PI染色图；C：Merge图
使用建议
为获得最优结果，建议根据细胞类型和密度优化染料浓度及孵育时间。
Calcein-AM/PI活死细胞双染试剂盒是一种经过充分验证的细胞活力分析工具，无论是基础研究还是药物开发，均是进行细胞活性评估的优质选择。
产品推荐
| 产品应用 | 产品名称 | 产品货号 |
| 细胞活死鉴别 | C331308 |